菲羅門色譜柱技術指南 - 如何增加Comix色譜柱的洗脫能力?
菲羅門Comix色譜柱是可以分離大極性化合物以及具備各種疏水與極性復雜化合物的強大工具
菲羅門Comix色譜柱包含了多種色譜分離模式,離子交換分離作用,正相分離,反相分離還有HILIC分離
菲羅門Comix色譜柱的七種固定相
Comixshell CARP與Comixsil RP-CX
表面陰離子嵌入鍵合,提供穩定的陽離子交換作用,疏水作用及陰離子排阻作用
Comixshell AIRP與Comixsil RP-AX
表面陽離子嵌入鍵合,提供穩定的陰離子交換作用,疏水作用及陽離子排阻作用
Comixsil RPAC
陰陽離子同時嵌入烷基鍵合硅膠,提供穩定的陽離子與陰離子交換作用(陰離子與陽離子排阻作用)
Comixsil ACRP
陰陽離子同時嵌入烷基鍵合硅膠,提供穩定的陰離子與陽離子交換作用(陽離子與陰離子排阻作用)
Comixsil HCS
表面陰離子嵌入鍵合,提供穩定的陽離子交換作用,表面長碳鏈提供穩定的疏水作用,特別適合強極性酸,以及各種單糖類分析
如何增加Comix的洗脫能力?
上一篇“Comix系列色譜柱使用說明書”里面說到不能超出Comix系列色譜柱的PH使用范圍,這款柱子始終保持在酸性條件里。
Comix對流動相的濃度是敏感的,改變緩沖鹽的濃度跟酸的濃度對Comix的洗脫能力變化明顯,下面我們看幾個案例來了解一下。
從上圖能看出,當流動相加入的緩沖鹽的濃度越大或者加入酸的濃度越大時,會增加Comix柱子的洗脫能力。
在方法開發的過程中,我們在物質保留過強或者化合物保留不佳的情況下,可以嘗試調節流動相中的緩沖液濃度來改變物質的保留時間;還可以嘗試用梯度的方式先走低濃度的緩沖鹽或者酸來增強物質的保留,再用高濃度的的緩沖鹽或者酸來加速強保留物質的洗脫,從而達到將我們需要的化合物分離開來或保留等目的。