色譜技術是一種分離分析手段,分離是核心,因此擔負分離作用的色譜柱是色譜系統的心臟。
對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好,分析速度快等。
關于色譜柱的安裝、維護、保存以及由色譜柱導致的這樣那樣的色譜故障也是一門學問。
菲羅門糖柱的正確使用包含:加裝保護柱,過濾流動相和樣品,凈化樣品,避免過高的柱壓,注意溫度和酸堿度,正確及時的沖洗等。
菲羅門糖柱怎樣正確沖洗?
開始試驗前,應了解柱中當前是何種溶劑。對于新色譜柱,如無特殊說明均為評價報告中所用流動相。
柱中當前溶劑一定要與分析樣品所用流動相互溶,如不能混溶,要用與二者均能相互混溶的第三種溶劑過渡。
異丙醇是能與各種溶劑混溶的試劑,可作為中介流動相使用。
反相鍵合硅膠柱適宜的保存環境是純甲醇,如分析用流動相為緩沖液2有機溶劑,可先用較低甲醇含量(<20%)的甲醇2水置換掉原來的純甲醇,再進分析用流動相,以防止在柱內發生鹽的沉淀;試驗結束后,要及時用適當的溶劑沖洗系統并終過渡到純甲醇沖洗,對于含有緩沖鹽的流動相,辦法是先用與分析用流動相組成完全相同但不含緩沖鹽的溶液進行沖洗,再逐步過渡到純甲醇沖洗。
多數沖洗液體積大約為柱容積的15~20倍,但終要以基線是否平直、壓力是否穩定決定。有些廠家的色譜柱標明了流動相中有機相的較低使用濃度為≥5%,使用時應給予注意。