氨基酸分析法匯總
概覽
?、認(rèn)識(shí)氨基酸
?、氨基酸的應(yīng)??
三、氨基酸分析?法的分類介紹
一、認(rèn)識(shí)氨基酸
氨基酸(aminoacid):含有氨基和羧基的一類有機(jī)化合物的通稱。是含有 堿性氨基和酸性羧基的有機(jī)化合物。氨基連在α-碳上的為α-氨基酸。組成蛋白質(zhì)的氨基酸均為α-氨基酸。
科學(xué)家們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)天然的氨基酸有300種,其中基本氨基酸有二十個(gè)品種,比較常見的氨基酸有蘇氨酸、賴氨酸、亮氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、色氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸8種氨基酸,人體不能夠自己制造的氨基酸,我們稱為必
須氨基酸,因此,需要由食物來提供。氨基酸是構(gòu)成蛋白質(zhì)的基本單位,賦予了蛋白質(zhì)特定的分子結(jié)構(gòu)形態(tài),使蛋白質(zhì)子具有生化活性。蛋白質(zhì)它是生物體內(nèi)最重要的活性分子之一,包括催化代謝的酶。
下圖為α-氨基酸的通式,生命體蛋白質(zhì)就是由上圖中的20種基本α-氨基酸構(gòu) 成的。在這些氨基酸中,除了甘氨酸(R=H)外,其它19種均為手性氨基 酸。即都有D,L構(gòu)型。
我們?cè)诤铣缮锼帲ǘ嚯念悾r(shí),采用的基本單元即這20種氨基酸。
二、氨基酸的應(yīng)用面
氨基酸的應(yīng)用面十分廣泛。結(jié)合我們分析領(lǐng)域常見的情況,總的來說有以下幾個(gè)方面:
1、作為必要營養(yǎng)的攝入---營養(yǎng)品,飲料,奶粉等
2、作為疾病治療的直接補(bǔ)充---大輸液、針劑等
3、作為生物藥的基本單元---多肽,蛋白類藥物
4、作為某種表征---身理缺陷,基因缺陷
三、氨基酸分析方法的分類介紹
1、??性氨基酸的分析?法介紹
2、手性氨基酸的分析方法介紹
(1)、HPLC-UV法(此法都需要對(duì)氨基酸進(jìn)行衍生)
(2)、HPLC-ELSD或RID法(此法不需要對(duì)氨基酸進(jìn)?衍?)
(3)、HPLC(或UPLC)-MS法(此法不需要對(duì)氨基酸 進(jìn)行衍生)
A、HPLC-UV PITC衍生分析法案例18種氨基酸
B、HPLC-UV OPA和FMOC衍生分析法 案例32種氨基酸
供貨信息: FMF-5560-E0 Titank C18 5u 150*4.6mm
C、 HPLC-UV DNFB 衍生分析法 案例
?前較多客戶使?,?于藥典中制劑18種氨基酸的分析,非常容易分析以下色譜柱推薦解決?譜柱供貨信息:
A.FMG-5560-EONU Titank C18 5u 250*4.6mm
B. FMG-5292-EONU SuperLu C18(2) 5u 250*4.6mm
(2)、HPLC-ELSD/CAD/UV法(此法不需要對(duì)氨基酸進(jìn)?衍?)
A.Comixsil HCS 對(duì)18種氨基酸的分析-ELSD
Comixsil CARP智能柱對(duì)16種非衍生氨基酸的分析-UV
Comixsil HCS智能柱對(duì)賴氨酸和精氨酸的分析----UV檢測(cè)器
Comixsil RP-100智能柱對(duì)20種氨基酸的分析
(2)、HPLC-UV法-適合某些氨基酸(此法不需要對(duì)氨基酸進(jìn)?衍?)
推薦SuperLu C18- AQ這類大極性柱
SuperLu C18 AQ對(duì)異亮氨酸與亮氨酸的分析UV檢測(cè)器
色譜柱:SuperLuC18-AQ5u250*4.6mm
流動(dòng)相:索取
流速:1.0mL/min,
進(jìn)樣量:10ul
檢測(cè)波長:210nm
(3)、HPLC(或UPLC)-MS法(此法不需要對(duì)氨基酸進(jìn)?衍?)
SuperLu C18-AQ柱推薦(1.8u,3u 100*2.1mm)
2、?性氨基酸的分析?法介紹
(1)、阿爾法(ɑ)型游離手性氨基酸拆分
(2)、FMOC或BOC等保護(hù)型手性氨基酸的拆分
(1)、阿爾法(ɑ)型游離手性氨基酸拆分推薦用柱:
Chiral AAOA 3u 50*4.6mm(FMB-AAOA3-EONU)
或Chiral AAOA 5u 150*4.6mm(FMF-AAOA-EONU)
(2)、FMOC或BOC等保護(hù)型各類手性氨基酸的拆分
保護(hù)型的各類氨基酸,全部可以在某種多糖型手性柱中實(shí)現(xiàn)手性拆分。推薦的一套
手性柱的供貨信息如下:
涂敷型一套(正相,成功率最高)
A、FMG-AC5-A01-NFC Chiral ND(2) 5u 250*4.6mm;
B、FMG-AC5-B01-NFC Chiral MD(2) 5u 250*4.6mm;
C、 FMG-AC5-B02-NFC Chiral MZ(2) 5u 250*4.6mm;
D、FMG-AC5-B03-NFC Chiral MJ(2) 5u 250*4.6mm;
涂敷型一套(反相,成功率沒有反相高,但也不錯(cuò),適合只想要反相條件的客戶)
A、FMG-AC5-A01-R Chiral ND(2)-RH 5u 250*4.6mm;
B、FMG-AC5-B01-R Chiral MD(2)-RH 5u 250*4.6mm;
C、 FMG-AC5-B02-R Chiral MZ(2)-RH 5u 250*4.6mm;
D、FMG-AC5-B03-R Chiral MJ(2)-RH 5u 250*4.6mm;
或者鍵合型一套
A、FMG-JY5-I01 Chiral INA 5u 250*4.6mm;
B、FMG-JY5-I02 Chiral INB 5u 250*4.6mm;
C、FMG-JY5-I03 Chiral INC 5u 250*4.6mm
以上手性柱拆分保護(hù)型氨基酸的起始流動(dòng)相建議:
正相體系中一般的流動(dòng)相條件是:0.1%的甲酸加入到80:20的正己烷:異丙醇中;
反相體系中一般的流動(dòng)相條件是:0.1%的TFA加入到40:60的水:乙腈的體系中;