Chiral AAOA 手性柱使用說明
·色譜柱信息
Chiral AAOA 手性柱是以高純度具有良好機械穩定性的硅膠為基質,通過鍵合 D-青霉胺于十八烷基柱上而成的配體交換型手性柱。
該系列手性柱專屬用于手性拆分脂肪族,芳香族的α型有機酸、α型非衍生氨基酸及其衍生物、二元胺、二肽、內酰胺、氨基醇等。
·色譜柱安裝與操作注意
新的 Chiral AAOA 系列手性柱保存在 5%異丙醇:95%的 2mM 硫酸銅水溶液中。使用前務必用流動相完全清洗管路后,再接色譜柱沖洗平衡 1 小時以上再進樣。
該系列手性柱的推薦流動相為 2mM 的硫酸銅水溶液:異丙醇=95:5(V/V)。流動相中異丙醇的比例不能超過 15%,過大比例會導致色譜柱的損壞。
·樣品與流動相
為了避免色譜柱的堵塞,所有樣品和溶劑,都必須在使用前用 0.45 ?m 或 0.22 ?m 的濾膜過濾。
建議可采用保護柱套(FCG-6000)和保護柱芯(FCG-6287)以攔截污染物和意外的鹽析。
流動相中任何時候不能含有無機酸,無機堿,不可用不含銅離子的鹽,否則將損壞色譜柱。
流動相一定要采用預混合方式走等度,在線混合方式將損壞色譜柱。樣品一定要用水或流動相溶解。
流動相中硫酸銅的濃度發生變化時或體系發生變化時,色譜柱要重新平衡 2 小時以上。
方法開法過程中的建議(按程序進行)
1. 異丙醇比例可向下調節至 0(將增加保留時間,分離度可能提升)或向上調節至最大 15%(將減小保留時間,分離度可能降低);
2. 可用乙腈(最高比例不超過15%)或甲醇(最高比例不超過30%)取代流動相中的有機成份異丙醇;
3. 溫度可調節的范圍為5-60 ℃;
4. 硫酸銅的濃度控制在 0.5mM 至 4mM 之間,一般使用為 2mM。注意隨著鹽濃度的增加,有機相的最高比例限會降低;
5. 可用0.5mM 醋酸銅+0.1M 的醋酸銨水溶液體系直接取代硫酸銅與異丙醇體系(pH 也可通過用醋酸或氨水調整在 4.5-7 之間);
色譜柱的保養
pH 避免在pH 低于 4.0 或高于 7.0 的條件下使用色譜柱。請盡量使用pH 在 4.5‐7.0 范圍內的流動相。
壓力 操作壓力要低于200 bar(或20MPa 或 2900Psi)。
溫度 最高操作溫度為60 ?C。盡量在50 ?C 以下使用。色譜柱必須在柱溫箱嚴格控溫下操作。
儲藏 每日用完時,務必用 5%異丙醇:95%的 2mM 硫酸銅水溶液以 0.5ml/min 流速沖洗 2 小時以上,并直接常溫保存。如果色譜柱長期不用,每隔 6 個月,需要用此流動相重新沖洗 2 小時以上再保存。