嬰幼兒配方奶粉中核苷酸含量測定
嬰幼兒奶粉中核苷酸的檢測
樣品制備:
精密稱取奶粉 5.0 g,加適量溫水,超聲 10 min 使溶解,加 10%醋酸溶液 5 mL,搖勻,靜置,再加水定容至 50 mL,搖勻,過濾,取上清液待用。
樣品凈化:
SPE 小柱:Polyclean X-HLB 60mg/3mL(貨號:9B-P001-06030)
活化:甲醇 3 mL
平衡:水 3 mL
上樣:2 mL 待凈化液
沖洗:20%甲醇/水溶液 3 mL
合并上樣流出液與沖洗流出液,再加水定容至 5 mL,作為待測溶液。
HPLC 測定:
色譜柱:Titank C18 5μm 250×4.6mm (貨號: FMG-5560-EONU)
流動相:0.1 M K2HPO4 溶液(用磷酸調節 pH 值至 5.6)為流動相A;乙腈為流動相B
流 速 :1 mL/min
進樣體積:5 μL
檢測波長:260 nm
溫度:常溫
梯度:
時間(分鐘) |
流動相 A(%) |
流動相 B(%) |
0 |
100 |
0 |
8 |
100 |
0 |
25 |
95 |
5 |
27 |
75 |
25 |
40 |
75 |
25 |
5 種核苷酸混標圖譜
Polyclean X-HLB 凈化后嬰兒配方奶粉圖譜