色譜分析中的選擇性的控制混合作用色譜柱介紹和方法開發精要
·什么是混合作用色譜？
What is Mixed-mode Chromatography?
West and co-workers defined the term as the combined use of two (or more) retention mechanisms in a single chromatographic system.
-C. West, et al., LCGC North Am. 30(6s), 22–33 (2017).
Gilar and co-workers further define the term as the use of multiple dominant retention mechanisms.
-Z. Kadlecova?, et al., J. Chromatogr. A 1625, 461301 (2020).
·什么時候需要用到混合作用色譜？
1. 當我們需要定量分析無機離子，但是沒有配備離子色譜儀時；
2. 當分析大極性有機小分子，但不能或者不想使用離子對試劑時；
3. 當需要同時保留和分離性質差異大的多個化合物（如強疏水，強親水等）時；
4. 當遇到一些帶強電荷基團（如季銨基）的化合物，用C18類色譜柱時峰形難以改善時；
色譜柱選擇的基本原則：
選擇的色譜柱可以和分析物有一種強的作用力，另一種弱的或者中等的作用力；
避免固定相與分析物存在兩種強的作用力，以免保留過強，需要過高濃度的緩沖鹽的流動相，同時很可能會導致峰形問題；
·Comix系列色譜柱方法開發的色譜柱選擇和流動相設計
·案例分析
反相作用：有機相越低作用越強；
HILIC作用：當有機相>70%時才比較明顯，有機相越高HILIC保留越強；
離子交換作用：當分析物上的基團與固定相上的基團所帶電荷相反時，就存在離子交換作用；可以通過調節pH值改變固定相和分析物上弱酸基團的電離程度，從而改變離子交換強度；同時可以通過改變緩沖劑的濃度和有機相濃度來調節離子強度，離子強度大洗脫更強；
離子排斥作用：當分析物上的基團與固定相上的基團所帶電荷相同時，就存在離子排斥作用；可以通過調節pH值改變固定相和分析物上弱酸基團的電離程度，從而調節離子排斥作用；同時可以通過改變緩沖劑的濃度和有機相濃度來調節離子強度，離子強度大，排斥越小。
