三氮唑與單、雙氰胺的HPLC分離
App ID: FLM-C220007
三氮唑與單、雙氰胺的HPLC分離
方法:自定
色譜柱:Comixsil RP-100 5u 250*4.6mm(貨號:FMG-100R5-EONU)
流動相:水:乙腈:1%硫酸=75:5:20
流速:0.8 mL/min
檢測:208nm
柱溫:15℃
案例說明:利用 Comixsil RP-100 的陽離子交換、疏水作用來保留與分離化合物。
什么是HPLC
歷史概述和定義
液相色譜的定義是二十世紀(jì)早期由俄羅斯植物學(xué)家 Mikhail S. 茨維特提出的。他最先嘗試在裝滿顆粒的柱子上使用溶劑來分離從植物中提取的化合物[樹葉色素]。茨維特用顆粒填滿開口的玻璃柱。他發(fā)現(xiàn)兩種特殊的材料,粉筆末(碳酸鈣)和氧化鋁很有用。他將樣品[混勻植物葉的溶劑提取物]倒入柱中,并讓樣品流過顆、粒床。隨后加入純?nèi)軇kS著樣品由于重力自上而下流過柱子,可看到不同顏色的譜帶被分開,因?yàn)橛行┙M分比另外一些移動得快。他將這些分開的不同顏色的譜帶與樣品中原有的不同化合物相關(guān)聯(lián)。他還根據(jù)每一種化合物對填料的化學(xué)親和性強(qiáng)弱,提出了分析這些化合物的分離規(guī)律。與顆粒填料有較強(qiáng)親和性的化合物移動慢,與溶劑有較強(qiáng)親和性的化合物移動快。這個過程可這樣描述:樣品中的化合物在流動的溶劑(流動相)與固體顆粒(固定相)間的分布不一樣。這樣使每一種化合物以不同的速度移動,從而產(chǎn)生了化合物之間的分離。
茨維特使用色譜法 chromatography [來自希臘字, chroma 意思是顏色, graphy 意思是記錄 - 直譯為顏色記錄] 來描述他的彩色試驗(yàn)。[令人好奇的是, 俄羅斯名字茨維特意思是顏色。]今天,液相色譜法,以各種形式,已成為分析化學(xué)中十分有力的工具之一。