App ID: FLM-SL230009
弗雷拉納及相關(guān)雜質(zhì)HPLC測(cè)定
方法:
色譜柱:SuperLu C18(2) 5μ 250*4.6mm(貨號(hào):FMG-5292-EONU)
流速:1.0 mL/min
柱溫:30℃
檢測(cè)器:UV 265nm
流動(dòng)相: 乙腈-0.1%甲酸溶液=65:35
圖譜
方法說(shuō)明:使用 SuperLu C18(2)分析弗雷拉納系統(tǒng)適用性溶液,API 與相鄰雜質(zhì)分離度可達(dá) 2.0 以上。
弗雷拉納(Ferrara)是一種草酸鹽染料,在高性能液相色譜(HPLC)分析中常用于測(cè)定相關(guān)雜質(zhì)。以下是一種常見的HPLC測(cè)定方法說(shuō)明:
1. 儀器和色譜條件:
- 使用高性能液相色譜儀(HPLC)進(jìn)行分析。
- 使用反相色譜柱,如C18柱,以保證分離的效果。
- 流動(dòng)相一般為水-有機(jī)溶劑的混合物,比如甲醇和水的梯度混合物可提供良好的分離。
- 設(shè)置列溫和檢測(cè)波長(zhǎng)適宜的條件。
2. 樣品制備:
- 將待測(cè)樣品中的雜質(zhì)溶解于適當(dāng)?shù)娜軇┲?。在溶解過(guò)程中,可使用超聲波輔助溶解以提高溶劑效果。
3. 色譜分析方法:
- 將待測(cè)樣品的適量注入HPLC系統(tǒng),并利用自動(dòng)進(jìn)樣器或手動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)行進(jìn)樣。
- 設(shè)置合適的進(jìn)樣量和流速來(lái)保證分析的準(zhǔn)確性和靈敏性。
- 使用合適的梯度混合物進(jìn)行洗脫和分離,并根據(jù)需要進(jìn)行優(yōu)化。
- 在梯度洗脫過(guò)程中,監(jiān)測(cè)信號(hào)強(qiáng)度,并記錄峰高或峰面積。
4. 定量分析:
- 根據(jù)弗雷拉納的吸光度特性,在所選擇的檢測(cè)波長(zhǎng)下,使用標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行定量分析。
- 使用一組被認(rèn)定含有已知濃度雜質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)樣品,制備一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
- 在樣品的同一濃度下,分別測(cè)定弗雷拉納和相關(guān)雜質(zhì)的峰高或峰面積,并與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行對(duì)比。
請(qǐng)注意,以上方法僅為一種常見的HPLC測(cè)定方法說(shuō)明,具體方法還需根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行優(yōu)化和調(diào)整。在使用任何分析方法之前,請(qǐng)確保熟悉儀器操作和安全操作規(guī)程,并遵循相關(guān)法規(guī)和指南。