制備色譜柱時應(yīng)遵循以下原則:
1. 選擇適合的柱材料:根據(jù)分離物性質(zhì)和分析要求,選擇合適的柱材料,如硅膠、碳鏈物質(zhì)、液相材料等。
2. 選擇適合的填充物:根據(jù)分析目標和柱的類型,選擇合適的填充物,如硅膠、高效液相色譜固定相、氣相色譜固定相等。填充物應(yīng)具有良好的穩(wěn)定性和分離性能。
3. 良好的柱內(nèi)均勻度:填充物在柱內(nèi)應(yīng)均勻分布,避免存在空隙或不均勻堆積,確保分離效果和重現(xiàn)性。
4. 適當?shù)奶畛鋲簩嵍龋禾畛湮锾畛涞拿芏群蛪簩嵍纫m中,過度壓實會增加柱內(nèi)壓力,影響流動相的通過,不足壓實則會導致柱內(nèi)流速過快或出現(xiàn)漏洞。
5. 避免柱內(nèi)污染:制備色譜柱時要保證工作環(huán)境的清潔,避免柱內(nèi)污染物的存在,盡量減少雜質(zhì)和異物的進入。
6. 適當?shù)墓袒幚恚焊鶕?jù)填充物的性質(zhì)和柱的類型,選擇適當?shù)墓袒幚矸椒ǎ缂訜峁袒⒐庹展袒龋_保填充物固定在柱內(nèi)壁上。
7. 質(zhì)量控制和測試:制備完成后,應(yīng)進行質(zhì)量控制和測試,如測試柱的壓力和流速性能,并進行性能測試,如分離效果和重現(xiàn)性等。
8. 合理的柱存儲和保養(yǎng):制備好的色譜柱應(yīng)妥善存儲,避免受到濕氣、高溫或其他有害因素的影響。在使用過程中,定期進行洗滌、再生、補充填充物等保養(yǎng)操作以延長柱的使用壽命。
總之,制備色譜柱應(yīng)綜合考慮分析目標、柱的類型、填充物的選擇以及柱內(nèi)均勻度等因素,遵循制備原則并進行質(zhì)量控制,以保證色譜柱的分離效果和重現(xiàn)性。