保護柱的選擇和使用指南如下:
1. 根據分析柱的填料品牌選擇保護柱,要與分析柱保持一致,以保證選擇性一致。
2. 根據分析柱的規格選擇匹配的保護柱,填料粒徑與分析柱的粒徑相近,保護柱的內徑與分析柱的內徑相近。
3. 對于精細分離,保護柱本身的裝填柱效要足夠好,以降低峰擴散,提高分離度。
4. 對于精細分離或者小內徑色譜柱分離,保護柱的連接死體積要盡可能小。
5. 如果是用于UHPLC柱,還要考慮保護柱的耐壓能力。
在使用保護柱的過程中,需注意以下幾點:
1. 專柱專用,避免保護柱成為不同項目的交叉污染源。
2. 當峰的理論塔板數下降15%,或是柱壓上升15%,或是關鍵分離度下降15%時,應及時更換保護柱。
3. 不慎發生強污染時,可以將分析柱卸下,單獨沖洗保護柱,可以使污染物更快的從保護柱中流出。但不可以超聲保護柱。
4. 在連接保護柱時,要盡可能縮短連接管路,減少死體積,降低柱外展寬效應。
5. 如同一保護柱配不同的分析柱使用,每次使用前,保護柱需先清洗并用流動相平衡保護柱一段時間后,再接分析柱使用。