HPLC測(cè)定已知雜質(zhì)時(shí)，可以按照以下步驟進(jìn)行計(jì)算：

1. 確定雜質(zhì)含量。根據(jù)色譜圖和對(duì)照品溶液的濃度，可以確定雜質(zhì)的含量。
2. 計(jì)算峰面積。測(cè)量供試品溶液色譜圖上各雜質(zhì)的峰面積，并乘以相應(yīng)的校正因子后與對(duì)照溶液主成分的峰面積比較。
3. 計(jì)算雜質(zhì)含量。將測(cè)量得到的峰面積與對(duì)照溶液主成分的峰面積進(jìn)行比較，可以計(jì)算出各雜質(zhì)的含量。

需要注意的是，HPLC測(cè)定雜質(zhì)時(shí)，需要使用對(duì)照品溶液進(jìn)行對(duì)比和校正。因此，在配制對(duì)照品溶液時(shí)，需要保證其濃度準(zhǔn)確可靠，并且與供試品溶液的進(jìn)樣量相同。同時(shí)，在計(jì)算峰面積時(shí)，也需要根據(jù)實(shí)際情況選擇合適的校正因子，以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。