HILIC模式色譜柱的原理是基于吸附色譜的分離方式,利用固定相的極性吸附作用和流動相的洗脫作用實現樣品的分離。HILIC模式色譜柱的固定相通常為極性填料,如硅膠或聚合物,表面含有親水基團和疏水基團。流動相則通常為高極性的有機溶劑,如甲醇、乙腈等,用于攜帶樣品通過色譜柱進行分離。
在分離過程中,樣品中的化合物首先在流動相和固定相之間進行分配,極性分子首先在主體流動相與色譜填料表面的半固定的高極性水膜之間發生液液分配。次級保留作用包括色譜填料表面硅醇基和/或極性官能團與帶電分析物發生的離子交換作用。此外,氫鍵作用也發生在帶正電的分析物與帶負電的表面硅醇基之間。
對于HILIC模式色譜柱的維護,需要注意以下幾點:
1. 避免使用磷酸鹽等強酸性添加劑,以免對色譜柱造成損害。
2. 在使用前,應進行色譜柱的平衡和清洗,確保色譜柱在使用前已經穩定且清潔。
3. 在使用過程中,應注意控制流速和流動相的比例,避免對色譜柱造成過大的壓力或流量波動。
4. 在使用結束后,應對色譜柱進行清洗和保存,避免樣品在色譜柱中殘留或產生污染。
總之,正確使用和維護HILIC模式色譜柱可以延長其使用壽命,提高分離效果和實驗結果的可靠性。