在反相色譜中，酸性pH值可以影響化合物的保留時間。隨著pH值的增加，酸性化合物的保留時間會縮短，而堿性化合物的保留時間會延長。

這是因為在酸性條件下，化合物的質子化會增加其疏水性，使其在反相柱上的保留增強。

相反，在堿性條件下，化合物的電離狀態會增加，從而降低其在流動相中的溶解度，導致保留時間縮短。