摘要:目的 結合外標法和面積歸一化法,建立反相高效液相色譜法測定Fmoc-L-His(Trt)-OH 中的光學異構體Fmoc-D-His(Trt)-OH 的含量。
方法 采用Chiral MX(2)-RH 色譜柱(4.6 mm×250mm,5 μm);以乙腈- 水- 乙酸(500∶500∶1)為流動相,等度洗脫;流速為0.8 mL·min- 1;紫外檢測器檢測,波長為220 nm;柱溫為30 ℃;進樣體積為10 μL。結果 Fmoc-L-His(Trt)-OH 和
Fmoc-D-His(Trt)-OH 分離良好;Fmoc-D-His(Trt)-OH 在0.15 ~ 2.93 mg·mL- 1 與峰面積呈良好的線性關系(相關系數為0.9999);定量限為0.15 μg·mL- 1,檢測限為0.049 μg·mL- 1。回收率在95% ~ 100% 內,RSD 為0.96%。結論 本方法操作簡單,專屬性強,靈敏度高,為Fmoc-L-His(Trt)-OH 中光學異構體Fmoc-D-His(Trt)-OH 研究提供參考。