左卡尼汀及其雜質以及手性異構體的分析
左卡尼汀(L-carnitine),又稱左旋肉堿,L-肉毒堿、維生素BT,化學式是C7H15NO3,化學名稱為(R)-3-羧基-2-羥基-N,N,N-三甲基丙銨氫氧化物內鹽。
左卡尼汀是一種促使脂肪轉化為能量的類氨基酸,純品為白色晶狀體或白色透明細粉 ,極易溶于水、乙醇、甲醇,微溶于丙酮,不溶于乙醚、苯、三氯甲烷、乙酸乙酯。
左旋肉堿極易吸潮,具有較好的溶水性和吸水性。對人體無毒副作用,紅色肉類是左旋肉堿的主要來源,人體自身也可合成來滿足生理需要。其并不是真正意義上的維生素,只是一種類似維生素的物質 。具有脂肪氧化分解、減肥、抗疲勞等多方面的生理功能,作為食品添加劑廣泛用于嬰幼兒食品、減肥食品、運動員食品、中老年人的營養補充劑、素食主義者的營養強化劑和動物飼料添加劑等。
然而,目前它被批準的適應癥只有用于防治左卡尼汀缺乏,例如慢性腎衰病人因血液透析所致的左卡尼汀缺乏,而且是美國國家腎臟病基金會指定的治療透析相關左卡尼汀缺乏癥(DCD)的唯一安全有效的藥物。
綜合左卡尼汀及其雜質與手性異構體的分離分析,菲羅門總結以下四種分析方法供相關分析工作者參考。
方法一:左卡尼汀及其雜質A的分離(HPLC+UV)
色譜柱:Titank HILIC 3μ 150×4.6mm(貨號:FMF-5567-EONU)
流動相:10mM 磷酸二氫鉀(pH 4.3)-乙腈=(20:80)
流速:0.6ml/min
檢測波長:205nm
柱溫:45℃
說明:使用Titank HILIC 色譜柱可較好分離左卡尼汀及雜質A,注意流動相采用高比例乙腈,而磷酸鹽在高比例乙腈中易鹽析,流動相應采用預混,不可采用在線混合。
方法二:膽堿、左卡尼汀、甜菜堿等膳食分析(HPLC+ELSD或CAD或MS檢測器)
色譜柱: Comixsil HCS 3μm 100x3.0 mm (貨號: FMD-HCS3-YONU)
流動相:乙腈: 200mM甲酸銨(pH3)=82: 18
流速: 1.0 mL/min
檢測: ELSD, 45°C
說明:此方法的的優勢在于可以使用質譜檢測器進行分析。
方法三:左卡尼汀的對映異構體USP手性分析方法
(參照 USP 方法,進行流動相比例調整)
色譜柱:ChiralSug TAG 5μ 250*4.6mm (貨號:FMG-TAG-EONU)
流動相:甲醇:0.2%三乙胺(醋酸調pH 至6.2)=60:40
流速:0.8 mL/min
柱溫:30℃
檢測器:UV 210nm
進樣體積:10μl
說明:此方法優勢在于不需要對樣品衍生直接分析,但是靈敏度相對來說差一些,對于較低含量檢測限要求的,此方法并不能滿足。
方法四:左卡尼汀(左旋肉堿)對映異構體的手性分析(衍生法)
樣品衍生化過程: (詳詢銷售代表)
色譜柱: Chiral MD(2)-RH 5u 250*4.6mm (貨號: FMG-AC5-B01-R)
流動相:反相(詳詢銷售代表)
流速:0.4 mI /min
檢測波長: 235 nm
柱溫:室溫
說明及客戶評價:相比于USP方法,本方法不受衍生化試劑手性純度影響,分離度和峰型都不錯,檢測靈敏度也滿足方法要求。實際應用中,也有一些客戶選擇Chiral MD(2)-RH 3u 250*4.6mm 獲得更大的分離度與更高的柱效。
上述應用中所含產品訂購信息:
方法一貨號:FMF-5567-EONU 描述:Titank HILIC 3μ 150×4.6mm
方法二貨號: FMD-HCS3-YONU 描述:Comixsil HCS 3μm 100x3.0 mm
方法三貨號:FMG-TAG-EONU 描述:ChiralSug TAG 5μ 250*4.6mm
方法四貨號:FMG-AC5-B01-R 描述:Chiral MD(2)-RH 5u 250*4.6mm
FMG-AC3-B01-R 描述:Chiral MD(2)-RH 3u 250*4.6mm
任何進一步了解,請隨時致電020-22826668聯系公司銷售代表咨詢。