流動相是色譜過程中攜帶待測組分向前移動的物質(zhì),與固定相處于平衡狀態(tài),帶動樣品向前移動。流動相的類型多樣,按組成可分為單組分流動相和多組分流動相;按極性可分為極性流動相、弱極性流動相和非極性流動相;按作用可分為底劑和洗脫劑;按使用方式可分為等度流動相和梯度流動相;按用途可分為己烷、甲苯、乙酸乙酯、乙醇、乙腈和水等。
流動相的特性主要包括以下幾點:
1. 流動相應(yīng)具有一定的溶解能力,以確保樣品組分不會沉淀在柱中或長時間保留在柱中。
2. 流動相與樣品之間不應(yīng)產(chǎn)生化學反應(yīng)。
3. 流動相的黏度應(yīng)盡量小,以便獲得好的分離效果,降低柱壓降,延長泵的使用壽命。
4. 流動相的物化性質(zhì)應(yīng)與使用的檢測器相適應(yīng),例如使用UV檢測器時,應(yīng)使用對紫外吸收較低的溶劑配制。
在選擇流動相時,需要考慮以下幾個標準:
1. 流動相應(yīng)不改變填料的任何性質(zhì),以避免影響色譜柱填床的性質(zhì)。
2. 流動相的純度要高,因為色譜柱的壽命與大量流動相通過有關(guān),特別是當溶劑所含雜質(zhì)在柱上積累時。
3. 流動相必須與檢測器匹配,以保證檢測結(jié)果的準確性。
在優(yōu)化流動相時,需要考慮以下幾個方面:
1. 溶解度優(yōu)化:優(yōu)化流動相組成需要兼顧溶解度和色譜效果的平衡。
2. 混合比優(yōu)化:通過試錯法,對不同比例的混合液進行實驗,找到最優(yōu)化的組成比例。
3. 溫度優(yōu)化:在一定溫度下進行分析,可以增加物質(zhì)的溶解度,降低流動相的粘度,從而縮短分析時間。
4. 酸堿性優(yōu)化:選擇合適的酸堿性條件可以提高分析效果。
綜上所述,流動相在色譜分析中扮演著至關(guān)重要的角色,其類型、特性和選擇標準對于實驗結(jié)果的準確性和可靠性具有重要影響。通過合理的選擇和優(yōu)化技術(shù),可以確保色譜分析的有效性和準確性。