液質(zhì)(液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù),LC-MS)靈敏度的提升是一個(gè)涉及多個(gè)方面的復(fù)雜過程。以下是一些關(guān)鍵措施,用于提高液質(zhì)的靈敏度:
### 1. 樣品處理與優(yōu)化
* **使用超純?nèi)軇┖驮噭?*:確保所有溶劑和試劑均為MS級,以減少背景噪聲和信號抑制。常用的溶劑包括水(如Milli-Q®超純水)、乙腈、甲醇等。
* **樣品前處理**:對于含鹽量較高的樣品,如食物、體液或組織,建議使用固相萃?。⊿PE)進(jìn)行脫鹽處理,以減少離子抑制和質(zhì)譜儀污染。
* **避免使用非揮發(fā)性緩沖液**:非揮發(fā)性緩沖液(如硫酸鹽、磷酸鹽、硼酸鹽)會導(dǎo)致離子源沉淀,影響靈敏度。應(yīng)使用揮發(fā)性緩沖液,如甲酸銨或乙酸銨。
### 2. 儀器設(shè)置與優(yōu)化
* **色譜柱選擇**:選用高質(zhì)量的色譜柱,并避免使用可能導(dǎo)致色譜柱塌陷的酸性條件。同時(shí),應(yīng)定期清洗色譜柱以減少污染。
* **系統(tǒng)死體積最小化**:最大限度地減少從進(jìn)樣器到檢測器單元的系統(tǒng)部件體積(不包括色譜柱體積),以減少色譜峰變寬、拖尾或分叉,從而提高分辨率和靈敏度。
* **泵入口過濾器維護(hù)**:定期更換泵入口過濾器,以降低基線噪音并保護(hù)系統(tǒng)和色譜柱。
### 3. 質(zhì)譜操作模式與參數(shù)優(yōu)化
* **全掃描、母離子及子離子掃描**:通過全掃描模式確定母離子質(zhì)量數(shù),然后利用子離子掃描模式進(jìn)一步確證子離子質(zhì)量數(shù)。這種方法可以提高對化合物的識別能力,從而間接提高靈敏度。
* **優(yōu)化錐孔電壓和碰撞能量**:這些參數(shù)對離子的傳輸效率和碎片化效率有重要影響,應(yīng)根據(jù)具體化合物進(jìn)行優(yōu)化。
* **采用高靈敏度檢測模式**:如選擇性離子監(jiān)測(SIM)或反應(yīng)監(jiān)測(RM)模式,這些模式可以針對特定質(zhì)量數(shù)的離子進(jìn)行檢測,從而提高信噪比和靈敏度。
### 4. 其他注意事項(xiàng)
* **避免污染**:在整個(gè)樣品處理和分析過程中,應(yīng)嚴(yán)格避免污染。例如,使用原裝瓶儲存溶劑,避免使用塑料裝置等。
* **儀器維護(hù)與保養(yǎng)**:定期對儀器進(jìn)行維護(hù)和保養(yǎng),如清洗離子源、調(diào)諧質(zhì)譜儀等,以確保儀器處于最佳工作狀態(tài)。
綜上所述,提高液質(zhì)靈敏度的關(guān)鍵在于樣品處理與優(yōu)化、儀器設(shè)置與優(yōu)化、質(zhì)譜操作模式與參數(shù)優(yōu)化以及避免污染等方面。通過綜合運(yùn)用這些措施,可以顯著提高液質(zhì)分析的靈敏度和準(zhǔn)確性。