SuperLu Amino 柱反相條件下分析還原糖的操作與再生維護(hù)建議
還原糖(乳糖、鹽酸氨基葡萄糖、阿卡波糖等)在用 SuperLu Amino 柱分析時,容易與固定相發(fā)生反應(yīng)(所有氨基柱的共同特點(diǎn)),也容易因硅膠表面質(zhì)子存在而影響峰形。
因此,在分析這類糖時,在新柱啟用以及舊柱每次使用前,細(xì)致的處理有利于獲得好的結(jié)果,步驟如下(特別重要):
1. 乙腈:水=70:30,1ml/min 流速,沖洗 40-60 分鐘; 2. 乙腈:水=70:30,并添加 0.1%的氨水(濃度約 32%),1ml/min 流速,沖洗 80-100 分鐘; 3. 乙腈:水=70:30,1ml/min 流速,沖洗 40-60 分鐘;
以上操作可去除硅膠表面質(zhì)子以獲得糖類好的峰形并適當(dāng)補(bǔ)充氨基。它同時適合非還原性糖分析時出現(xiàn)的可能峰形問題。
SuperLu Amino 因氨基損失而柱效下降,可以通過以下操作嘗試再生:
1.PH=10.5 的氨水 0.6ml/min 沖洗 1 小時; 2.乙腈:水=70:30,1ml/min 流速,沖洗 30 分鐘; 3.100%異丙醇沖洗 20 分鐘,沖洗后可直接保存;
附:如果條件允許更改方法不用氨基柱的話,推薦以下案例,采用 Comixsil HCS 柱分析鹽酸氨基葡萄糖,硫酸氨基葡萄糖,解決壽命與重現(xiàn)上的問題。 色譜柱:Comixsil HCS 3u 100*4.6mm(貨號:FMD-HCS3-EONU) 柱溫:30 度 流速;1.0ml/min 流動相: 乙腈:100mM 乙酸銨(pH5.0)=60:40 檢測器: ELSD
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