在手性柱使用過程中,溶劑的互溶性問題是一個需要特別注意的方面。這主要是因為手性柱的固定相通常較為敏感,不同的溶劑可能會對其產(chǎn)生不同的影響,甚至導(dǎo)致固定相的損壞或分離效果的下降。以下是一些關(guān)于溶劑互溶性問題需要注意的要點:
### 一、溶劑選擇的基本原則
1. **避免強溶劑**:涂覆型手性固定相禁用強溶劑作為流動相,如氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯以及丙酮等。這些溶劑可能會使多糖衍生物溶解或溶脹,從而破壞固定相。
2. **使用推薦溶劑**:應(yīng)選用色譜柱說明書或相關(guān)文獻(xiàn)中推薦的溶劑作為流動相。這些溶劑通常已經(jīng)過驗證,能夠確保手性柱的穩(wěn)定性和分離效果。
### 二、溶劑互溶性的具體考慮
1. **混合溶劑的互溶性**:當(dāng)使用混合溶劑作為流動相時,需要確保各組分之間具有良好的互溶性。如果溶劑之間不互溶,可能會導(dǎo)致色譜柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡、分層等現(xiàn)象,嚴(yán)重影響分離效果。
2. **添加劑的互溶性**:在流動相中添加緩沖鹽或其他添加劑時,也需要注意這些添加劑與溶劑之間的互溶性。如果添加劑在溶劑中的溶解度有限,可能會導(dǎo)致其在色譜柱內(nèi)析出或沉積,對色譜柱造成損害。
### 三、操作過程中的注意事項
1. **溶劑預(yù)處理**:在將溶劑接入色譜系統(tǒng)之前,應(yīng)確保溶劑已經(jīng)過適當(dāng)?shù)念A(yù)處理,如過濾、脫氣等,以去除其中的雜質(zhì)和氣泡。
2. **流速控制**:在更換溶劑或調(diào)整流動相比例時,應(yīng)逐步改變流速,避免突然的沖擊對色譜柱造成損害。
3. **定期維護(hù)**:定期對色譜柱進(jìn)行清洗和維護(hù),以確保其性能的穩(wěn)定和延長使用壽命。在清洗過程中,也需要注意溶劑的選擇和互溶性問題。
### 四、案例分析
以菲羅門手性柱為例,其固定相所使用的鍵合技術(shù)使得色譜柱能夠在強有機溶劑中保持穩(wěn)定。然而,這并不意味著可以使用任何強溶劑作為流動相。在實際使用過程中,仍需遵循上述溶劑選擇的基本原則和注意事項。此外,菲羅門手性柱還可以在反相、正相、極性有機和SFC分離模式下使用,但不同模式下對溶劑的要求也有所不同。
綜上所述,手性柱使用過程中需要注意的溶劑互溶性問題涉及多個方面,包括溶劑的選擇、混合溶劑的互溶性、添加劑的互溶性以及操作過程中的注意事項等。只有充分考慮這些因素,才能確保手性柱的穩(wěn)定性和分離效果。