Princeton SFC 世界领导者
FLM Comix 超神色谱柱
FLM Chiral 手性色谱柱
FLM F-BronX 气相GC色谱柱-毛细管色谱柱
FLM TitanK 有机色谱柱
Sielc Promix 生物色谱柱
APP ID NO. : FLM-S170008
普洱中農藥多殘留檢測的固相萃取方法
（SuperClean GCB/NH2）
一、實驗目的
本研究利用固相萃取作為樣品前處理方法，GC-ECD 和 LC-MS/MS 作為分析方法，檢測普洱中的農藥殘留水平。
該方法操作簡便，可簡化樣品前處理過程，減少有機溶劑的使用。
二、應用范圍
本方法適用于茶葉中有機磷類、有機氯類、擬除蟲菊酯類和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定。
三、實驗材料
NuAnalytical SuperClean GCB/NH2 固相萃取柱 500 mg/500 mg/6 mL。
四、實驗方法
1、樣品提取
稱取粉碎好的普洱 2 g(精確到 0.001 g)，加入 50 mL 離心管中，加入 10 mL 乙腈，劇烈振蕩 1 min，靜置 30min，4000 r/min 離心 5 min。上清液待凈化。
2、SPE柱活化
GCB/NH2 固相萃取柱中加入約 2 cm 高無水硫酸鈉，使用前使用 10 mL 乙腈-甲苯(3:1，v/v)活化。
3、上樣和洗脫
當溶液液面到達柱吸附層表面時，立即倒入上述待凈化溶液 4 mL, 用雞心瓶接收流出液，逐步加入 25 mL 乙腈-甲苯(3:1，v/v)洗滌小柱，收集上述所有流出液于雞心瓶中。
4、重新溶解
流出液于 40 ℃水浴中旋蒸至 1 mL 左右，加入 2 mL 乙腈轉移至 10 mL 試管中，于40 ℃下氮氣吹干，加入 1 mL 乙腈溶解殘渣，0.22 μm 微孔濾膜過濾，分別供 GC-ECD 和LC-MS/MS 上機測試。
5、儀器條件
（1）、 GC-ECD 條件
氣相儀器：Agilent 7890A
色譜柱：FB-5, 30 m×0.32 mm, 0.25 μm
進樣口溫度：220 ℃
檢測器溫度：300 ℃
升溫程序：180 ℃(保持 2 min)；以 10 ℃/min 升溫到 230 ℃(保持 2 min)；以 2 ℃/min
升溫到 260 ℃(保持 2 min)；以 25 ℃/min 升溫到 270 ℃(保持 1.6 min)
載氣：氦氣
流速：1.6 mL/min
進樣方式：分流進樣（分流比 10:1）
（2）、LC-MS/MS 條件
質譜儀：API 4000
色譜柱：SuperLu C18(2.0 mm×150 mm, 5 μm)
流動相：A: 0.1%甲酸+10 mM 乙酸銨(1 mL 甲酸+0.77 g 乙酸銨溶于 1 L 水中)；B: 甲醇
洗脫方式：梯度洗脫，洗脫程序如下：
|
時間/min |
A(%) |
B(%) |
|
0.0 |
95 |
5 |
|
1.50 |
95 |
5 |
|
6.0 |
5 |
95 |
|
11.0 |
5 |
95 |
|
11.01 |
95 |
5 |
|
15 |
95 |
5 |
流速：0.35 mL/min
柱溫： 40 ℃
進樣體積：5 μL
離子源：電噴霧(ESI)
掃描模式：正離子模式
檢測方式：多反應監測(MRM) 質譜儀離子源參數如下：
|
Source/Gas |
|
|
Collision Gas (CAD) |
6 |
|
Curtain Gas (CUR) |
12 |
|
Ion Source Gas 1 (GS1) |
50 |
|
Ion Source Gas 2 (GS2) |
50 |
|
Ion Spray Voltage (IS) |
5500 |
|
Temperature (TEM) |
550 |
|
Interface Heater (IHE) |
ON |
|
物質名稱 |
保留時間/min |
檢測離子對 |
DP |
EP |
CE |
CXP |
|
涕滅威 |
7.06 |
208.1＞89.1
208.1＞116 |
30
30 |
10
10 |
22
10 |
12
12 |
|
克百威 |
7.13 |
222.3＞123.1
222.3＞165.2 |
48
48 |
10
10 |
16
31 |
12
12 |
|
涕滅威砜 |
6.25 |
223.1＞86.2
223.1＞148.4 |
69
69 |
10
10 |
21
13 |
12
12 |
|
涕滅威亞砜 |
6.10 |
207.1＞132.2
207.1＞89.1 |
60
60 |
10
10 |
13
22 |
12
12 |
|
啶蟲脒 |
6.83 |
223.4＞126.1
223.4＞90 |
70
70 |
10
10 |
29
46 |
12
12 |
五、實驗結果
1、普洱中農藥多殘留的添加回收結果
表 1 0.25 mg/kg 普洱中有機氯和擬除蟲菊酯類農藥多殘留的添加回收結果
|
|
|
回收率（%） |
|
|
|
|
名稱 |
|
|
|
平均回收率（%） |
RSD (%) |
|
|
1 |
2 |
3 |
|
|
|
乙烯菌核利 |
84.5 |
76.0 |
80.0 |
80.2 |
5.30 |
|
腐霉利 |
110.5 |
102.0 |
105.0 |
105.8 |
4.07 |
|
異菌脲 |
112.0 |
107.5 |
119.0 |
112.8 |
5.14 |
|
聯苯菊酯 |
94.5 |
87.5 |
90.5 |
90.8 |
3.87 |
|
甲氰菊酯 |
109.5 |
100.0 |
106.5 |
105.3 |
4.61 |
|
高效氟氯氰菊酯 |
84.0 |
79.5 |
82.5 |
82.0 |
2.79 |
|
氟氯氰菊酯 |
86.5 |
86.8 |
94.1 |
89.1 |
4.83 |
|
氟氰戊菊酯 |
120.5 |
114.0 |
120 |
119.2 |
3.06 |
|
氰戊菊酯 |
95.5 |
85.0 |
92.9 |
91.1 |
6.00 |
|
氟胺氰菊酯 |
70.4 |
72.75 |
81.0 |
74.7 |
7.45 |
表 1 0.05 mg/kg 普洱中氨基甲酸酯類農藥多殘留的添加回收結果
|
|
|
回收率（%） |
|
|
|
|
名稱 |
|
|
|
平均回收率（%） |
RSD (%) |
|
|
1 |
2 |
3 |
|
|
|
涕滅威 |
95.6 |
87.2 |
90.0 |
90.9 |
4.70 |
|
克百威 |
84.4 |
78.0 |
82.2 |
81.5 |
3.99 |
|
涕滅威砜 |
77.4 |
83.0 |
81.4 |
80.6 |
3.58 |
|
涕滅威亞砜 |
70.0 |
74.4 |
75.2 |
73.1 |
3.73 |
|
啶蟲脒 |
82.4 |
94.0 |
88.4 |
88.3 |
6.57 |
2、普洱中農藥多殘留檢測色譜圖
圖 1 添加水平為 0.25 mg/kg 普洱中有機氯和擬除蟲菊酯類農藥多殘留檢測色譜圖
圖 2 添加水平為 0.0625 mg/kg 普洱中氨基甲酸酯類農藥多殘留檢測色譜圖
