APP ID NO. :FLM-S170023
水產(chǎn)品中喹乙醇檢測的固相萃取方法
(PolyClean X- HLB)
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>
本研究利用固相萃取作為樣品前處理方法,HPLC作為分析方法,檢測水產(chǎn)品樣品中的喹乙醇的殘留水平。該方法操作簡便,可簡化樣品前處理過程,減少有機(jī)溶劑的使用。
二、實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)物
喹乙醇(CAS:23696-28-8)
三、應(yīng)用范圍
本方法適用于水產(chǎn)品中喹乙醇的檢測的HPLC檢測及確證。
四、參考標(biāo)準(zhǔn)
《GB/T 8381.7-2009飼料中喹乙醇的測定 高效液相色譜法》
五、實(shí)驗(yàn)材料
NuAnalytical PolyClean X-HLB固相萃取柱60mg/3mL。六、實(shí)驗(yàn)方法
1、 樣品待測溶液制備
準(zhǔn)確稱取5 g勻漿魚肉試樣(精確到0.001 g)于50 mL具塞塑料離心管中,加入35 mL甲醇-水溶液(5:95,v/v),離心管置入搖床中,室溫下恒溫振蕩器振蕩速度110 r/min,避光振蕩45min。提取液在3500 r/min下離心10min,上清液經(jīng)濾紙過濾,濾液加入10 mL正己烷,充分混勻后,以5000 r/min離心10 min,棄取上層溶液,下層溶液待凈化。
2、活化
依次用3 mL甲醇和3 mL水活化。
3、上樣和洗脫
將待凈化液的樣品清液加入已活化好的固相萃取柱中,以1 mL/min的流速過柱,棄去濾液。依次用3 mL 0.02 mol/L鹽酸溶液、0.1 mol/L鹽酸溶液、甲醇-水溶液(5:95, v/v)淋洗固相萃取柱,棄去淋洗液,用吸耳球吹出小柱中殘留液。用5 mL甲醇洗脫固相萃取柱,收集洗脫液。
4、重新溶解
洗脫液于40 ℃氮?dú)獯蹈桑?/span>2 mL甲醇定容,0.22 μm微孔濾膜過濾,供HPLC測定。
5、HPLC條件
色譜柱:SuperLu C18 (250×4.6mm,5μm)
檢測器:UV@380 nm
流動(dòng)相:A:甲醇 B:0.1mol/L甲酸水溶液
柱溫:室溫
流速:1.0mL/min
進(jìn)樣量:20μL
洗脫方式:梯度洗脫,梯度條件如下:
時(shí)間/min |
A/% |
B/% |
0 |
15 |
85 |
3 |
15 |
85 |
7 |
70 |
30 |
12 |
70 |
30 |
16 |
15 |
85 |
20 |
15 |
85 |
七、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1、魚肉基質(zhì)中喹乙醇的2mg/kg添加回收結(jié)果
名稱 |
回收率(%) |
平均回收率(%) |
RSD(%) |
||
1 |
2 |
3 |
|||
喹乙醇 |
90.3 |
88.7 |
85.5 |
88.1 |
2.77 |
2、添加水平為2mg/kg魚肉基質(zhì)中喹乙醇檢測色譜圖
圖1 添加水平為2mg/kg魚肉基質(zhì)中喹乙醇檢測色譜圖