APP ID NO. : FLM-S170029
生姜中涕滅威及其代謝物檢測的固相萃取方法
(SuperClean NH2)
一、實驗目的
本研究利用固相萃取法作為生姜樣品的前處理方法,LC-MS/MS 法作為檢測手段。該方法可簡化樣品的前處理過程,節省有機溶劑的使用,操作簡便。
二、實驗目標物
三種涕滅威及其代謝物標準品:涕滅威(CAS:116-06-03),涕滅威砜(CAS:1646-88-4), 涕滅威亞砜(CAS:1646-87-3)。
三、應用范圍
本方法適用于生姜、大米、花生等樣品中涕滅威、涕滅威砜及涕滅威亞砜 LC-MS/MS檢測及確證。
四、參考標準
《SN/T 2441-2010 進出口食品中涕滅威、涕滅威砜、涕滅威亞砜殘留量檢測方法液相色譜-質譜/質譜法》
五、實驗材料
NuAnalytical SuperClean NH2 固相萃取柱 500 mg/3 mL。
六、實驗方法
1、 樣品待測溶液制備
稱取 5.0 g 生姜試樣(精確至 0.01 g)于 50 mL 離心管中,加入 20 mL 乙腈,均質 2 min,振蕩提取 20 min,上清液過無水硫酸鈉收集到分液漏斗中,殘渣再加入 20 mL 乙腈,重復上述操作一次,合并 2 次濾液,加入 20 mL 用乙腈飽和的正己烷,振蕩 10 min,靜置分層,棄去正己烷層,乙腈層于 40 ℃下旋轉蒸發濃縮至干,用 2 mL 甲醇-二氯甲烷(1:99, v/v)溶解, 待凈化。
2、活化
5mL 甲醇-二氯甲烷(1:99, v/v)活化,棄去流出液。
3、上樣和洗脫
加入待凈化液,流速控制在 1 mL/min 內,收集流出液,用 5 mL 甲醇-二氯甲烷(1:99,v/v)洗脫,接收流出液,并重復一次,合并前后兩步的流出液。
4、重新溶解
40 ℃緩慢氮氣流條件下吹至近干(約 0.5 mL)后揮干,用 1.0 mL 乙腈-0.1%甲酸水溶液(10:90,v/v)定容至 1 mL,過 0.45μm 微孔濾膜,供 LC-MS/MS 測定。
5、LC-MS/MS 條件
質譜儀:API 4000
色譜柱:SuperLu C18(2.0 mm×150 mm, 5 μm)
流動相:A: 乙腈 B: 0.05%甲酸水溶液
洗脫方式:梯度洗脫,洗脫程序如下:
時間/min
A(%)
B(%)
0.00
10
90
1.50
10
90
4.00
100
0
8.00
100
0
8.01
10
90
13.00
10
90
流速:0.3 mL/min
柱溫: 30 ℃
進樣體積:5 μL
離子源:電噴霧(ESI)
掃描模式:正離子模式
檢測方式:多反應監測(MRM) 質譜儀離子源參數如下:
Source/Gas
Collision Gas (CAD)
6
Curtain Gas (CUR)
30
Ion Source Gas 1 (GS1)
50
Ion Source Gas 2 (GS2)
50
Ion Spray Voltage (IS)
5500
Temperature (TEM)
600
Interface Heater (IHE)
ON
涕滅威、涕滅威砜及涕滅威亞砜的母離子和子離子參數表:
物質名稱
保留時間/min
檢測離子對
DP
EP
CE
CXP
涕滅威
7.47
208.1/89.1
208.1/116.0
30
30
10
10
22
10
12
12
涕滅威砜
5.40
207.1/132.2
207.1/89.1
60
60
10
10
13
22
12
12
涕滅威亞砜
2.86
223.1/86.2
223.1/148.1
60
60
10
10
21
13
12
12
七、實驗結果
1、生姜基質 10 μg/kg 加標回收結果
表 1 生姜中 10 μg/kg 加標回收實驗結果
回收率(%)
名稱 |
1 |
2 |
3 |
平均回收率(%) |
RSD(%) |
涕滅威 |
89.23 |
96.74 |
92.86 |
92.94 |
4.05 |
涕滅威砜 |
94.65 |
86.96 |
92.35 |
91.32 |
4.33 |
涕滅威亞砜 |
94.63 |
93.26 |
89.98 |
92.62 |
2.58 |
2、添加水平為 10 μg/kg 生姜基質中涕滅威及其代謝物檢測的色譜圖
圖 1 涕滅威及其代謝物總離子流圖 圖 2 涕滅威(Aldicarb)(208.1/89.1)質譜圖
圖 3 涕滅威砜(Aldicarb S)(223.1/86.2)質譜圖 圖 4 涕滅威亞砜(Aldicarb Sulfone)(207.1/132.2)質譜圖