飲料中胭脂紅檢測(cè)的固相萃取方法

(Polyclean X- WAX)

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>

本研究利用固相萃取法作為樣品的前處理方法，HPLC 法作為分析方法，檢測(cè)飲料中著色劑的含量。該方法可簡(jiǎn)化樣品的前處理過(guò)程，節(jié)省有機(jī)溶劑的使用，操作簡(jiǎn)便。

二、實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)物

胭脂紅(CAS:569-64-2)。

三、應(yīng)用范圍

本方法適用于飲料中合成著色劑的檢測(cè)的 HPLC 檢測(cè)及確證。

四、參考標(biāo)準(zhǔn)

《GB/T 21916-2008 水果罐頭中合成著色劑的測(cè)定》。

五、實(shí)驗(yàn)材料

Polyclean X-WAX 固相萃取柱 60mg/3mL(Cat.No. 9B-P005-03060)。

六、實(shí)驗(yàn)方法1、樣品提取

準(zhǔn)確稱(chēng)取樣品 5.0 g 于 50 mL 離心管中，超聲波振蕩提取 5 min， 渦旋 1 min，4000

r/min 離心 5 min，上清液轉(zhuǎn)移至 50 mL 離心管中,用水定容至 5 mL。

2、SPE 柱活化

Polyclean X-WAX 固相萃取柱使用前用 2 mL 甲醇、2mL 水活化 。3、上樣和淋洗

在 Polyclean X-WAX 萃取柱上加入 5 mL 待凈化樣品，收集流出液，然后用 2 mL 水、

2 mL5%氨化甲醇淋洗。

4、洗脫

用 4 mL 37%鹽酸-乙醇（1:19,v/v）進(jìn)行洗脫，控制流速 1 mL/min，收集洗脫液。

5、重新溶解

流出液 60 ℃減壓至干，加 1 mL 水定容，混勻，過(guò) 0.45 μm 濾膜，待上機(jī)測(cè)試。

5、HPLC 條件
設(shè)    備 ：Waters Alliance 2690
色譜柱 ：Neptune C18 (4.6×250 mm,5 μm)
檢測(cè)器 ：Waters 2487 紫外檢測(cè)器
流動(dòng)相：A：甲醇         B：0.02 mol/L 乙酸銨緩沖溶液
洗脫方式：梯度洗脫

表 1 梯度洗脫條件

時(shí)間/min	A%	B%
--	5	95
10.00	20	80
18.00	60	40
25.00	60	40
25.10	5	95
40.00	5	95

流速：1.0 mL/min
檢測(cè)波長(zhǎng)：509 nm
進(jìn)樣體積:20 μL

七、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

1、5 mg/kg 飲料中胭脂紅的添加回收結(jié)果