尿液中三環抗抑郁藥檢測的快速萃取方法
(SuperClean SLE)
一、實驗目的
應用SuperClean SLE液-液萃取柱快速提取人體尿液中的三環類抗抑郁藥。
二、實驗目標物
鹽酸舍曲林(CAS:79559-97-0)
三、實驗材料
NuAnalytical SuperClean SLE液-液萃取柱1 mL。
四、實驗方法
1、 樣品預處理
將尿液與濃氨水(99:1, v/v)混合,添加外標。輕輕渦旋混勻。
2、上樣
向SLE柱中加入1 mL預處理的樣品,然后加負壓或正壓啟動流速,然后讓樣品吸附于填料中約5分鐘。
3、 洗脫
向柱中加入4 mL正己烷:異丙醇(98:2,v/v)的混合溶劑。使溶劑通過重力流出并收集洗脫液,然后再向柱中加入4 mL的混合溶劑,收集洗脫液。在收集結束后加適當的正壓或負壓并收集最終洗脫出的溶劑
4、濃縮
將上述收集的提取液于35℃左右的溫度低真空下濃縮,再用緩氮氣流去除溶劑,使其濃縮至近干,取1 mL乙腈定容,0.22 μm微孔濾膜過濾,供HPLC測定。
5、HPLC條件
色譜柱:SuperLu C18 (250×4.6mm,5μm)
檢測器:UV@220 nm
流動相:A:0.1%的氨水-水 B:0.1%的氨水-乙腈
柱溫:室溫
流速:1.0 mL/min
進樣量:20μL
洗脫方式:梯度洗脫,梯度程序如下:
時間/min |
A/% |
B/% |
0.0 |
20 |
80 |
2.5 |
20 |
80 |
20 |
15 |
95 |
21 |
20 |
80 |
26 |
20 |
80 |
五、實驗結果
1、尿液中鹽酸舍曲林的回收結果
表1 尿液中鹽酸舍曲林的回收結果
名稱 |
保留時間/min |
平均回收率/% |
鹽酸舍曲林 |
11.57 |
78.3 |