QuEChERS EN方法用于大米中農藥多殘留的檢測
（Rapid QuEChERS）
一、實驗目的
本研究利用分散固相萃取（QuEChERS）法作為樣品的前處理方法，GC-ECD和LC-MS/MS法作為分析方法，檢測大米中的農藥多殘留。該方法可簡化樣品的前處理過程， 節省有機溶劑的使用，操作簡便。
二、應用范圍
本方法適用于含脂類和蠟類物質較多的水果、蔬菜和谷物等中農藥多殘留檢測及確證
三、參考標準
《BS EN 15662:2008 Foods of plant origin-Determination of pesticide residues using GC-MS and/or LC-MS/MS following acetonitrile extraction/partitioning and clean-up by dispersive SPE-QuEChERS-method》
四、實驗材料
NuAnalyticalRapid QuEChERS提取管50mL、Rapid QuEChERS凈化管15 mL。
五、實驗步驟
1、 樣品提取
將大米在-18℃下冷凍，徹底粉碎。準確稱取粉碎好的大米10.0g于50mL離心管中，加入10mL乙腈，振搖1min;再加入QuEChERS萃取鹽包（4g無水硫酸鎂、1g氯化鈉、1g檸檬酸鈉和0.5g檸檬酸氫二鈉），用力振搖1min，4000r/min離心5min。上層乙腈層待凈化。。
2、樣品凈化
取待凈化的上層乙腈層6mL于15mL QuEChERS凈化管(900mgMgSO4、150mgPSA和150mg C18)中，渦旋1min，4000r/min離心5min。取上清液1mL，過0.22μm濾膜，待上機測試。
3、儀器條件
（1）、GC-ECD條件
氣相儀器：Agilent7890A
色譜柱：FB-5，30m×0.32mm，0.25μm
進樣口溫度：220℃
檢測器溫度：300℃
升溫程序：180℃(保持2 min)，以10℃/min升溫到230℃(保持2min)，以2℃/min升溫到260℃(保持2min)，以25℃/min升溫到270℃(保持1.6min)
載氣：氦氣
流速：1.6mL/min
進樣方式：分流進樣，分流比10:1
（2）、LC-MS/MS條件
色譜柱：SuperLuC18(2.0mm×150mm，5μm)
質譜儀：API4000
流動相：A:0.1%甲酸+10mM乙酸銨(取1 mL甲酸和0.77g乙酸銨至1 L水溶液中)
B:甲醇
洗脫方式：梯度洗脫，梯度洗脫程序如下：
|
保留時間/min |
A/% |
B/% |
|
0.0 |
95 |
5 |
|
1.5 |
95 |
5 |
|
6.0 |
5 |
95 |
|
11.0 |
5 |
95 |
|
11.01 |
95 |
5 |
|
15.0 |
95 |
5 |
流速：0.35mL/min
柱溫：40℃
進樣體積：5μL
離子源：電噴霧(ESI)
掃描模式：正離子模式
檢測方式：多反應監測(MRM)
質譜儀離子源參數如下：
|
Source/Gas |
|
|
Collision Gas (CAD) |
6 |
|
Curtain Gas (CUR) |
12 |
|
Ion Source Gas 1 (GS1) |
50 |
|
Ion Source Gas 2 (GS2) |
50 |
|
Ion Spray Voltage (IS) |
5500 |
|
Temperature (TEM) |
550 |
|
Interface Heater (IHE) |
ON |
氨基甲酸酯類農藥各組分名稱、保留時間及母離子和子離子檢測離子對：
|
物質名稱 |
保留時間/min |
檢測離子對 |
DP |
EP |
CE |
CXP |
|
涕滅威 |
7.06 |
208.1/89.1 208.1/116 |
30 30 |
10 10 |
22 10 |
12 12 |
|
克百威 |
7.13 |
22.3/123.1 222.3/165.2 |
48 48 |
10 10 |
16 31 |
12 12 |
|
滅多威 |
6.51 |
163.2/88.1 163.2/106.1 |
36 36 |
10 10 |
15 12 |
12 12 |
|
涕滅威砜 |
6.25 |
223.1/86.2 223.1/148.1 |
69 69 |
10 10 |
21 13 |
12 12 |
|
甲萘威 |
7.18 |
202.1/145.2 202.1/127.1 |
58 58 |
10 10 |
12 40 |
12 12 |
|
多菌靈 |
6.82 |
192.1/160.1
192.1/132.2 |
68
68 |
10
10 |
34
42 |
12
12 |
六、實驗結果
1、大米中農藥多殘留的添加回收結果
表1 0.2mg/kg大米中有機氯類、擬除蟲菊酯類農藥多殘留的添加回收結果
|
名稱 |
1 |
回收率（%）
2 |
3 |
平均回收率（%） |
RSD（%） |
|
五氯硝基苯 |
82.0 |
81.0 |
83.0 |
82.00 |
1.22 |
|
百菌清 |
84.0 |
86.0 |
91.5 |
87.17 |
4.46 |
|
乙烯菌核利 |
84.0 |
81.5 |
84.0 |
83.17 |
1.74 |
|
三唑酮 |
103.5 |
99.0 |
102.5 |
101.67 |
2.32 |
|
腐霉利 |
98.4 |
94.5 |
97.5 |
96.80 |
2.11 |
|
異菌脲 |
103.5 |
98.0 |
100.0 |
100.50 |
2.77 |
|
聯苯菊酯 |
107.5 |
101.5 |
107.5 |
105.5 |
3.28 |
|
甲氰菊酯 |
86.5 |
81.5 |
85.0 |
84.33 |
3.04 |
|
高效氟氯氰菊酯 |
92.0 |
87.5 |
88.4 |
89.30 |
2.67 |
|
氟氯氰菊酯 |
87.6 |
85.45 |
85.8 |
86.28 |
1.34 |
|
氯氰菊酯 |
71.5 |
76.85 |
71.2 |
73.18 |
4.34 |
|
氟氰戊菊酯 |
131.2 |
123.2 |
124.5 |
126.30 |
3.40 |
|
氰戊菊酯 |
102.5 |
98.5 |
88.0 |
96.33 |
7.77 |
|
氟胺氰菊酯 |
92.9 |
90.4 |
90.7 |
91.33 |
1.49 |
|
溴氰菊酯 |
117.5 |
111.5 |
109.0 |
112.67 |
3.88 |
|
表2 0.05mg/kg黃瓜中氨基甲酸酯類農藥多殘留的添加回收結果 |
|||||
|
名稱 |
1 |
回收率（%）
2 |
3 |
平均回收率（%） |
RSD（%） |
|
涕滅威 |
94.6 |
93.6 |
99.2 |
95.8 |
3.12 |
|
克百威 |
89.6 |
91.6 |
91.2 |
90.8 |
1.17 |
|
滅多威 |
107.6 |
114.4 |
111.2 |
11.07 |
3.06 |
|
多菌靈 |
75.8 |
82.0 |
82.6 |
80.13 |
4.70 |
|
涕滅威砜 |
97.2 |
104.4 |
101.2 |
100.93 |
3.57 |
|
涕滅威亞砜 |
93.0 |
100.0 |
101.6 |
98.20 |
4.66 |
|
甲萘威 |
86.6 |
85.8 |
92.6 |
88.33 |
4.21 |
圖1 添加水平為0.2mg/kg大米中有機氯和擬除蟲菊酯類農藥多殘留檢測色譜圖
圖2 添加水平為0.05mg/kg大米中氨基甲酸酯類農藥多殘留檢測色譜圖
