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硫胺素焦磷酸和磷酸吡哆醛的 HPLC 分離
研究發現,血液中硫胺素焦磷酸和磷酸吡哆醛的水平與阿爾茨海默病相關聯。
由于復雜的樣品制備以及傳統 C18 色譜柱無法獲得保留,使用離子對試劑的方法又不能和質譜檢測器兼容,這使得血液中這兩種化合物的 LC/MS 分析成為一項極富挑戰的工作。
SIELC 開發了一種LC/MS 方法,采用 SIELC 公司的Primesep SB 反相陰離子交換色譜柱, 使用簡單的流動相梯度,這兩種化合物既能獲得良好的保留和分離。
生物流體中其它的極性酸性化合物,現在,也可以采用這種方法來進行分析。
色譜柱:Primesep SB 5μm 50×4.6mm(貨號:SB-46.050.0510)
流動相:
A:50mL 乙腈 + 250mL 0.2%甲酸溶液 + 700mL 水
B:200mL 乙腈 + 500mL 1.6%甲酸溶液 + 300mL 水
梯度:
時間/min |
流動相 A/% |
流動相 B/% |
0 |
100 |
0 |
3 |
0 |
100 |
6 |
0 |
100 |
流速:1ml/min
檢測波長:290nm