相同的質量控制,可以確保不同批次色譜柱的高重現性,也可以保證您更容易地在UHPLC和HPLC方法之間進行轉換,或需要分離和純化目標化合物時放大到制備應用上。
柱效當然會改變,但可以預料的是,譜帶間距(選擇性)將相同。
圖14闡明了當使用相同的ACE鍵合相但不同粒徑填充的色譜柱進行操作時,可以預見到分析物一致的譜帶間距類型(選擇性)。
圖 14:將ACE固定相從UHPLC(2μm)擴展到HPLC(3μm和5μm)再至制備型HPLC(10μm)時,選擇性得到了保留與保證。
條件
流動相:35:65 MeCN/0.1%TFA(溶于水中)
溫度:22 ℃
波長:254 nm
分析物
1. 尿嘧啶
2. 4-羥基苯甲酸
3. 乙酰水楊酸
4. 苯甲酸
5. 2-羥基苯甲酸
6. 對羥基苯甲酸乙酯
試驗樣品的這些色譜圖在填充有相同的鍵合相但不同粒徑的色譜柱上以相同的流動相條件運行,結果闡明分離從UHPLC擴展到HPLC再到制備型HPLC的容易程度。
當使用ACE Excel UHPLC色譜柱進行快速方法開發,且該方法必須可轉移到HPLC時,易擴展性則顯得特別有價值。
圖 15:ACE固定相可以提供相同的選擇性,無論它們是UHPLC、HPLC還是制備型HPLC色譜柱
條件
色譜柱:2.1 x 50 mm
流動相:1.4分鐘內從30% B至90% B
A = 20mM甲酸銨+ 0.1%甲酸
B =乙腈+ 0.1%甲酸
梯度:在30%B時持續0.30分鐘,在1.10分鐘內從30至90%B,在90%B時持續0.40分鐘
流速:0.5 mL/min
柱溫:30oC
檢測:AB Sciex Triple Quad(TM)5500 MS,以ESI(+)模式運行
儀器:島津Prominence UFLC系統
分析物
1. 甲苯咪唑
2. 普羅替林
3. 阿米替林
4. 洛哌丁胺
試驗樣品的這些色譜圖在ACE Excel C18 2μmUHPLC色譜柱、ACE C18 3μmHPLC色譜柱和ACE C185μm色譜柱上以相同的流動相條件運行,結果闡明ACE固定相的選擇性一致,無論填充粒徑如何。
這使得從UHPLC到HPLC或HPLC再到UHPLC的方法轉移更加容易。同時也使得從分析型應用擴展到制備型應用更加容易。