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- 中國藥典氨基酸分析柱 Mercury AA 菲羅門Mercury系列專用液相色譜柱特別針對《中國藥典》而開發,完美地符合藥典對于柱效、分離度、相對保留時間和對稱因子等參數的各項要求,并且具有良好的質量穩定性和高度的批間重現性,從而可幫助制藥企業對藥品質量進行有效監控。
菲羅門Mercury系列專用液相色譜柱特別針對《中國藥典》而開發,完美地符合藥典對于柱效、分離度、相對保留時間和對稱因子等參數的各項要求,并且具有良好的質量穩定性和高度的批間重現性,從而可幫助制藥企業對藥品質量進行有效監控。
Mercury AA 氨基酸分析柱
特點:
* Mercury AA ( 氨基酸分析) 色譜柱專為分離與分析游離氨基酸而設計,以硅膠基質反相固定相材料為填料。
* Mercury AA 固定相以高純度具有良好機械穩定性的硅膠為基質,采用高純度鍵合試劑,通過創新獨有的技術確保最大單分子層覆蓋和全封尾。
高度可控的單分子層形成和封尾技術保證了可靠的柱間重現性。
* Mercury AA 表面覆蓋率已達到最大化,因此具有優異的穩定性。
該填料為均一的球形顆粒,孔徑為120 ?,比表面積為 300 m2/g。
通過運用獨有的勻漿填裝技術裝填得到的 Mercury AA 柱柱床密度均一穩定,因此可保證具有最高的柱效。
通過 PITC 衍生化方法,18 種氨基酸可在Mercury AA 柱獲得高分辨率的快速分析。
注意事項:
新的 Mercury AA 柱是置于高有機水溶液中運輸的,在儲存和運輸過程中,硅膠填料可能會干涸。
這時推薦用10-20 倍柱體積的純有機溶劑如甲醇、乙腈進行沖洗以活化色譜柱。
接著可用用戶自己選擇的流動相沖洗色譜柱。流速由0.1mL/min 逐漸升至所需的操作條件,直至基線穩定為止。
如果柱壓和基線波動較大,這可能是氣泡進入了色譜柱中。
這時可用較高流速沖洗色譜柱 2-5 分鐘,例如對于 4.6x250mm 的色譜柱可采用流速1.5 mL/min。
pH 為了獲得最佳的分離效果和延長柱的使用壽命,請盡量使用 pH 在 3 - 7.5 范圍內的流動相。
壓力 盡管 Mercury AA 柱可在高至 5000 psi 的壓力下使用,但正常的操作壓力應當低于 3000 psi。
溫度 最高操作溫度為 60℃。
儲藏 長期不用時,保存在純有機溶劑如乙腈
供貨信息:
貨號 |
描述 |
規格 |
包裝 |
FMG-AAAA-EONU |
Mercury 5u AA |
250*4.6mm |
Ea |
氨基酸分析步驟
1. 原理
這種分析氨基酸的方法基于柱前衍生步驟,衍生化反應是在堿性條件下完成的,采用異硫氰酸苯酯和游離氨基酸反應生成的 PTC- 氨基酸衍生物可于 UV 254 nm 處被檢測到。
通過PITC 衍生法改善的氨基酸分離同樣使其分析更有效。
2. 試劑
三乙胺溶液: 將 1.4 mL 三乙胺和 8.6 mL 乙腈混和均勻。異硫氰酸苯酯溶液:配成 12.5 μL/mL 的異硫氰酸苯酯的乙腈溶液。
18 種氨基酸標準溶液:溶解或稀釋一定量的 18 種氨基酸于0.1 mol/L 鹽酸中, 配制成 0.5 μmol/mL18 種氨基酸標準溶液。
醋酸鈉溶液:將 16.4 g 無水醋酸鈉溶解于 2.0 L 水中,配制成0.1 mol/L 的醋酸鈉溶液,用冰醋酸調節 pH到 6.5。
3. 衍生化反應
轉移 200 μL 18 種氨基酸標準溶液(或樣品溶液)放入1.5mL 塑料管中, 加入 100 μL 三乙胺溶液和 100μL 異硫氰酸苯酯溶液,混合,至于室溫下反應 1h 后,加入 400 μL 正己烷,渦旋振蕩 10min。
取下后用 0.45μm 濾膜過濾后進樣。
4. 液相色譜分析
色譜柱: Mercury AA 5u 250*4.6mm (FMG-AAAA-EONU)
流速: 1.0 mL/min
溫度: 36℃
檢測: UV 254 nm
進樣量: 5 μL
流動相 A: 0.1 mol/L 醋酸鈉,pH 6.5 : 乙腈 = 93 : 7 (v/v)
流動相 B: 乙腈 : 水 = 80 : 20 (v/v)